常用名

埃博霉素B

英文名

epothilone B

CAS號

152044-54-7

分子量

507.682

密度

1.1±0.1 g/cm3

沸點

680.2±55.0 °C at 760 mmHg

分子式

C27H41NO6S

熔點

95-97oC

閃點

365.2±31.5 °C

體外研究

Epothilone B在HCT-116細胞系細胞毒性試驗中抑制HCT116細胞，IC50為0.8 nM [1]。埃坡霉素B（Patupilone）是一種微管（MT）靶向劑。如MTT細胞增殖試驗所示，處理72小時后，埃坡霉素B有效抑制細胞生長，IC50為6 nM，而濃度≤1nM則無細胞毒性。 Epothilone B在1nM的非細胞毒性濃度下顯著抑制transwell細胞遷移，并且在10nM時效果更明顯[2]。埃坡霉素B（Patupilone）是人成神經管細胞瘤細胞系中新的非紫杉烷相關和非神經毒性的微管穩定劑。埃坡霉素B降低D341細胞系的增殖活性，IC50為0.53 nM;在D425Med細胞系中，IC50為0.37 nM;在DAOY細胞系中，IC50為0.19 nM。在D341Med細胞系中，埃坡霉素B對克隆形成存活的作用是在埃坡霉素B的劑量范圍內，類似于增殖活性和活力水平（IC50,0.50-0.75nM）。然而，D425Med和DAOY細胞的克隆形成能力已經在埃坡霉素B濃度降低10倍（IC50,30pM）時大大降低。這些結果總體上表明埃坡霉素B對不同成神經管細胞瘤細胞系具有高效[3]。

體內研究

用Epothilone B（Patupilone）或單獨的電離輻射治-療導致10天內部分腫瘤生長受抑制，而聯合治-療發揮強大的超加性腫瘤生長控制，在隨訪期間完全腫瘤消退（P <0.005，用于電離輻射或單獨的埃坡霉素B與聯合治-療）[3]。

激酶實驗

在細胞溶質細胞提取物中測定Asp-Glu-Val-Asp（DEVD）酶活性。用遞增濃度的埃坡霉素B（Patupilone）處理細胞6,12,24和48小時。然后通過胰蛋白酶/ EDTA收獲細胞，離心，并用預冷的PBS洗滌。將細胞沉淀懸浮于5體積的預冷緩沖液A（20mM HEPES-KOH [pH 7.5]，10mM KCl，1.5mM MgCl 2,1mM EDTA鈉，1mM EGTA鈉，1mM二硫蘇糖醇[DDT]，250mM）中蔗糖和0.1mM苯甲基磺酰氟[PMSF]補充有蛋白酶抑制劑[5mg / mL胃蛋白酶抑制劑A，10mg / mL亮肽素，2mg / mL抑肽酶，2mg / mL DTT和1mM PMSF]。在冰上孵育15分鐘后，通過冷凍和解凍破壞細胞。將細胞裂解物在4℃下以1000g離心10分鐘，并將上清液在100000g下進一步離心30分鐘。將所得上清液（S-100級分）儲存在-80℃。為了確定半胱天冬酶3樣活性，將來自S-100級分的75μg蛋白質在37℃下與比色性半胱天冬酶3底物N-乙酰基-Asp-Glu-Val-Asp對硝基苯胺（100mM; Ac- DEVD-pNA）和1mM dATP，終體積為120μL。使用GenTec分光光度計在405nm監測胱天蛋白酶底物的切割[3]。