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**組織化學(xué)染色結(jié)果評(píng)價(jià)
對(duì)免**組織化學(xué)染色所得結(jié)果的判斷要持科學(xué)態(tài)度,根據(jù)對(duì)照實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確判斷陽(yáng)性和陰性結(jié)果,排除假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果。為使實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤,應(yīng)多次重復(fù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。*后得出科學(xué)的結(jié)論。為達(dá)此目的,首先應(yīng)學(xué)會(huì)區(qū)別特異性和非特異性染色結(jié)果。非特異性染色的特點(diǎn)是:細(xì)胞和間質(zhì)染色無(wú)區(qū)別或間質(zhì)染色更強(qiáng);染色無(wú)特定部位,無(wú)結(jié)構(gòu)性;染色五分布規(guī)律,某一部位均勻著色;染色出現(xiàn)在切片的干燥部位、邊緣、刀痕或組織折疊處。排除非特異性染色之后,應(yīng)確定特異性染色在組織細(xì)胞中的部位和程度,并且考慮是否有必要進(jìn)行半定量測(cè)定。
《一》以抗原表達(dá)模式定位
1.細(xì)胞質(zhì)內(nèi)彌散性分布,多數(shù)**組織化學(xué)染色為胞質(zhì)型陽(yáng)性反應(yīng),如細(xì)胞角蛋白(Cytokeratin,CK)和波形蛋白(Vimentin)等。
**組織化學(xué)染色(SP法。AEC顯色)
胚胎12天人員端腦背側(cè)腦室區(qū)司見(jiàn)波形蛋L(Vimentin)**反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞:其胞體位于腦室區(qū)。一端伸出長(zhǎng)突起到達(dá)軟腦膜
2.細(xì)胞核周邊胞質(zhì)內(nèi)分布,其判別要點(diǎn)是細(xì)胞核輪廓被勾畫(huà)得很清楚,如CD3多克隆抗體的染色。
3.胞漿內(nèi)局限性點(diǎn)狀陽(yáng)性反應(yīng),如CDI$抗體的染色。
4.細(xì)胞膜線性陽(yáng)性反應(yīng),大多數(shù)**細(xì)胞標(biāo)志物的染色均如此,如CD20。
5.細(xì)胞核陽(yáng)性反應(yīng),如BrdU、Ki-67及雌、孕**受體蛋白等。
有些抗原的陽(yáng)性表達(dá)可同時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞的不同部位,如細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜等。
《二》陽(yáng)性染色結(jié)果定量
1.計(jì)算**反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)方法是選擇每個(gè)樣品中10個(gè)非重疊視野,計(jì)算每個(gè)視野中的陽(yáng)性細(xì)胞與總細(xì)胞數(shù)的百分比,取平均數(shù),連續(xù)觀察和計(jì)算至少二個(gè)條件相同的樣品。得出數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后可在計(jì)算機(jī)MicrosoftExcel中作出柱形圖。
2.另一種方法以染色陽(yáng)性強(qiáng)度和陽(yáng)性檢出率相結(jié)合而定,一般陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在0~25為陰性,25~50為+,50~75為++,75以上為+++。此種判定方法容易出現(xiàn)人為誤差,現(xiàn)已很少在論文中出現(xiàn)。
3.圖像分析系統(tǒng)檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果。
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使用Elisa試劑盒發(fā)表論文獎(jiǎng)勵(lì)
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**組織化學(xué)抗體的稀釋度、滴加與操存
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