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選擇骨髓瘤細(xì)胞的條件

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      骨髓瘤細(xì)胞能產(chǎn)生并分泌大量的**球蛋白，這樣的瘤細(xì)胞融合后，可能影響或降低所分泌抗體的滴度，所以必須選育出非分泌**球蛋白缺陷型的骨髓瘤細(xì)胞。
　　選擇骨髓瘤細(xì)胞的條件：
     ①該瘤細(xì)胞系的來源應(yīng)與制備脾細(xì)胞小鼠為同一品系，以便兩者的組織相容性抗原一致；
     ②骨髓瘤細(xì)胞必須是靜息狀態(tài)，不產(chǎn)生γ球蛋白或不分泌到細(xì)胞外；
    ③骨髓瘤細(xì)胞生長需要一個(gè)較高的細(xì)胞密度,*好106個(gè)細(xì)胞/ml；
     ④生長速度快，繁殖時(shí)間短。常用的Balb/c小鼠產(chǎn)生的骨髓瘤細(xì)胞株有：①S194/5XXO·BU·1；②SP2/0—Ag14（簡稱SP2）；③P2—X—Ag8·6·5·3（簡稱653）；④FO以653*為常用，它是由礦物油4－甲基－15烷（Pristane，降植烷）誘發(fā)出來的一種漿細(xì)胞瘤（MinerolOilplasmacytoma，MOPC）并經(jīng)過培育形成一株8-氮鳥嘌呤有抵抗力的亞系。
      骨髓瘤細(xì)胞一般由有關(guān)單位直接引入，保存于-195℃液氮罐中，試驗(yàn)時(shí)復(fù)蘇、增殖、傳代即可。由于骨髓瘤細(xì)胞是半貼壁狀態(tài)，很容易脫落，因此不需要胰酶處理。為了防止出現(xiàn)返祖現(xiàn)象，在融合前，可將培養(yǎng)基內(nèi)加入15μg/ml8－氮鳥嘌呤。取約1×107～6×107對數(shù)生長期（即培養(yǎng)15h～20h）的骨髓瘤細(xì)胞，在室溫離心（400g）10min，沉淀以2.5%FCS—1640液再懸浮并計(jì)數(shù)。

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