描述

Regorafenib monohydrate 是一種多靶點(diǎn)抑制劑，對(duì)VEGFR1/2/3，PDGFRβ，Kit，RET 和 Raf-1 的 IC50 分別為 13 nM，4.2 nM，46 nM，22 nM，7 nM，1.5 nM 和 2.5 nM。

相關(guān)類別

信號(hào)通路 >> 自噬 >> 自噬

研究領(lǐng)域 >> 癌癥

靶點(diǎn)

VEGFR1:13 nM (IC50)

VEGFR2:4.2 nM (IC50)

VEGFR3:46 nM (IC50)

PDGFRβ:22 nM (IC50)

Raf-1:2.5 nM (IC50)

Braf:28 nM (IC50)

BRafV600E:19 nM (IC50)

體外研究

Regorafenib有效抑制NIH-3T3 / VEGFR2細(xì)胞中的VEGFR2自身磷酸化，IC50為3 nM。在HAoSMC中，瑞格非尼在用PDGF-BB刺激后抑制PDGFR-β自身磷酸化，IC50為90nM。瑞格非尼抑制VEGF165刺激的HUVECs的增殖，IC50為3 nM [1]。瑞格非尼引起Hep3B細(xì)胞生長(zhǎng)的濃度依賴性降低，IC50為5μM。瑞格非尼隨后增加了磷酸化c-Jun（一種JNK靶標(biāo)）的水平，但未增加Hep3B細(xì)胞中的總c-Jun水平[3]。

體內(nèi)研究

瑞格非尼有效抑制Colo-205異種移植物的生長(zhǎng)，劑量范圍為10-100mg / kg，在第14天以10mg / kg劑量達(dá)到75％的TGI。在MDA-MB-231模型中，瑞格列尼在低至3 mg / kg的劑量下非常有效，導(dǎo)致顯著的TGI為81％，在10和30 mg / kg的劑量下增加至93％，其中腫瘤達(dá)到瘀滯[1]。

激酶實(shí)驗(yàn)

初始體外激酶抑制譜分析在Millipore Corporation以Millipore標(biāo)準(zhǔn)條件下固定的1μM化合物濃度[10μM腺苷-5'-三磷酸（ATP）濃度]進(jìn)行。從選定的響應(yīng)激酶（例如VEGFR1和RET）確定50％的抑制濃度（IC 50）值。使用谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的重組融合蛋白，TIE2的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域和肽生物素-Ahx-EPKDDAYPLYSDFG作為底物，用均相時(shí)間分辨熒光（HTRF）測(cè)定法測(cè)量TIE2激酶抑制[1]。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

對(duì)于增殖測(cè)定，GIST 882和TT細(xì)胞在含有L-谷氨酰胺的RPMI培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，MDA-MB-231，HepG2和A375細(xì)胞在DMEM中總是含有10％hiFBS。將細(xì)胞用胰蛋白酶消化，以5×10 4個(gè)細(xì)胞/孔鋪板于含有10％FBS的完全培養(yǎng)基中的96孔板中，并在37℃下生長(zhǎng)過(guò)夜。第*二天，加入在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中連續(xù)稀釋至10μM至5nM終濃度的載體或Regorafenib，和0.2％DMSO，并繼續(xù)培養(yǎng)96小時(shí)。使用CellTitre-GloTM [1]量化細(xì)胞增殖。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

小鼠[1]雌性無(wú)胸腺NCr nu / nu小鼠皮下接種5×10 6個(gè)Colo-205或MDA-MB-231細(xì)胞或植入1mm 3 786-O腫瘤碎片。當(dāng)腫瘤達(dá)到100 mm3時(shí)，Regorafenib或載體對(duì)照在786-O模型中口服qd×21，在Colo-205和MDA-MB-231模型中分別以劑量100劑量qd×9， 30,10和3毫克/千克。紫杉醇每2天×10次以10mg / kg在乙醇/ Cremophor EL /鹽水（12.5％/ 12.5％/ 75％）中靜脈內(nèi)施用。每周估計(jì)腫瘤大小（體積）（l×w2）/ 2，并且從終末腫瘤重量（1-T / C×100）獲得腫瘤生長(zhǎng)抑制（TGI）的百分比。從治*療的第*一*天開(kāi)始每隔一*天對(duì)小鼠稱重。每天監(jiān)測(cè)小鼠的一般健康狀況。

參考文獻(xiàn)

[1]. Wilhelm SM, et al. Regorafenib (BAY 73-4506): a new oral multikinase inhibitor of angiogenic, stromal and oncogenic receptor tyrosine kinases with potent preclinical antitumor activity. Int J Cancer, 2011, 129(1), 245-255.

[2]. Heng DY, et al. Targeted therapy for metastatic renal cell carcinoma: current treatment and future directions. Ther Adv Med Oncol, 2010, 2(1), 39-49.

[3]. Carr BI, et al. Fluoro-Sorafenib (Regorafenib) effects on hepatoma cells: growth inhibition, quiescence, and recovery. J Cell Physiol, 2013, 228(2), 292-297.

2-Pyridinecarboxamide, 4-[4-[[[[4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl]amino]carbonyl]amino]-3-fluorophenoxy]-N-methyl-, hydrate (1:1)

MGN125FS9D

regorafenib monohydrate

4-[4-({[4-Chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl]carbamoyl}amino)-3-fluorophenoxy]-N-methyl-2-pyridinecarboxamide hydrate (1:1)

4-[4-({[4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl]carbamoyl}amino)-3-fluorophenoxy]-N-methylpyridine-2-carboxamide monohydrate

Regorafenib (monohydrate)

Regorafenib hydrate [JAN]

bay 73-4506 monohydrate

UNII-MGN125FS9D

4-[4-({[4-chloro-3-(trifluoromethyl) phenyl] carbamoyl} amino)-3-fluorophenoxy]-N-methylpyridine-2-carboxamide monohydrate

Stivarga

regorafenib hydrate

4-[4-({[4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl]carbamoyl}amino)-3-fluorophenoxy]-pyridine-2-carboxylic acid methylamide monohydrate

Stivarga (TN)